在單細(xì)胞測(cè)序、原代細(xì)胞培養(yǎng)等生命科學(xué)研究中,高質(zhì)量單細(xì)胞懸液的制備是實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵前提。手工制備不僅耗時(shí)費(fèi)力,還容易出現(xiàn)細(xì)胞活性低、結(jié)團(tuán)率高、重復(fù)性差等問(wèn)題,成為很多科研人的實(shí)驗(yàn)瓶頸。而單細(xì)胞懸液制備儀的出現(xiàn),打破了這一困境,以標(biāo)準(zhǔn)化、自動(dòng)化、高效化的優(yōu)勢(shì),成為實(shí)驗(yàn)室的 “單細(xì)胞制備神器”

就拿小鼠唾液腺單細(xì)胞懸液制備實(shí)驗(yàn)來(lái)說(shuō),借助單細(xì)胞懸液制備儀,僅需短短數(shù)分鐘就能完成組織消化,最終獲得活率超 94% 的高質(zhì)量單細(xì)胞懸液,細(xì)胞結(jié)團(tuán)率控制在 5% 左右,遠(yuǎn)優(yōu)于傳統(tǒng)手工操作,完美滿足后續(xù)細(xì)胞計(jì)數(shù)、測(cè)序等實(shí)驗(yàn)要求。今天,我們就來(lái)聊聊這款科研利器,看看它究竟有多 “能打”!
02、告別手工繁瑣,一鍵解鎖標(biāo)準(zhǔn)化制備
傳統(tǒng)手工制備單細(xì)胞懸液,從組織剪碎、酶解消化到過(guò)濾離心,每一步都依賴實(shí)驗(yàn)人員的操作經(jīng)驗(yàn),不僅全程耗時(shí)超 2 小時(shí),還容易因酶解時(shí)間、機(jī)械剪切力度把控不當(dāng),導(dǎo)致細(xì)胞損傷、活性驟降。

而單細(xì)胞懸液制備儀憑借智能化程序設(shè)計(jì),讓整個(gè)制備過(guò)程變得簡(jiǎn)單高效。以小鼠唾液腺制備為例,只需提前選好儀器預(yù)設(shè)的 “唾液腺專屬程序”,將剪碎的組織放入消化管并加入消化酶,儀器即可自動(dòng)完成恒溫酶解、溫和剪切,5 分鐘就能完成組織解離,全程無(wú)需人工值守,徹底告別手搖、攪拌等繁瑣操作。

單細(xì)胞裝機(jī)實(shí)驗(yàn)圖
儀器還配備了標(biāo)準(zhǔn)化的操作流程,從酶解溫度到剪切轉(zhuǎn)速都精準(zhǔn)調(diào)控,避免了手工操作的人為誤差,讓不同批次、不同人員的實(shí)驗(yàn)結(jié)果高度一致,大幅提升實(shí)驗(yàn)重復(fù)性。
03、核心優(yōu)勢(shì)拉滿,解鎖高質(zhì)量單細(xì)胞
一款優(yōu)秀的單細(xì)胞懸液制備儀,不僅要高效,更要能保證細(xì)胞質(zhì)量。而這類儀器憑借三大核心設(shè)計(jì),很好地解決了手工制備的痛點(diǎn),讓單細(xì)胞懸液的活性、純度、均一性都達(dá)到科研級(jí)標(biāo)準(zhǔn)。
1.溫和解離,高活率不損傷細(xì)胞
儀器采用低損傷機(jī)械剪切 + 精準(zhǔn)酶解協(xié)同的方式,在打破組織細(xì)胞間連接的同時(shí),最大限度保護(hù)細(xì)胞膜完整性。搭配智能溫控模塊,可根據(jù)不同組織類型精準(zhǔn)調(diào)控酶解溫度(如 37℃恒溫酶解),避免過(guò)度消化導(dǎo)致細(xì)胞破裂。像小鼠唾液腺實(shí)驗(yàn)中,最終獲得的細(xì)胞活率可達(dá) 94% 以上,遠(yuǎn)高于傳統(tǒng)手工方法。
2.精準(zhǔn)過(guò)濾純化,低結(jié)團(tuán)高純度
制備儀配套專用 70μm 濾網(wǎng),可高效過(guò)濾組織碎片,結(jié)合 “消化液:終止液 = 1:1” 的精準(zhǔn)終止體系,快速終止酶解反應(yīng)。后續(xù)搭配裂紅溶液、碎片去除劑的標(biāo)準(zhǔn)化純化流程,能有效去除死細(xì)胞、細(xì)胞碎片和紅細(xì)胞,最終獲得的單細(xì)胞懸液結(jié)團(tuán)率可控制在 5% 左右,細(xì)胞純度大幅提升,避免碎片和團(tuán)塊干擾后續(xù)細(xì)胞計(jì)數(shù)、測(cè)序等實(shí)驗(yàn)。

3.多場(chǎng)景適配,一機(jī)搞定多種組織
無(wú)論是柔軟的唾液腺、脾臟,還是致密的腫瘤、腎臟、神經(jīng)組織,儀器都內(nèi)置了專屬優(yōu)化程序,還支持自定義設(shè)置酶解時(shí)間、轉(zhuǎn)速等參數(shù),滿足不同組織的制備需求。同時(shí)部分機(jī)型支持多通道獨(dú)立運(yùn)行,可同步處理多種樣本,大幅提升實(shí)驗(yàn)效率,特別適合批量樣本研究。

04、實(shí)操流程超簡(jiǎn)單,新手也能快速上手
以小鼠唾液腺單細(xì)胞懸液制備為例,用單細(xì)胞懸液制備儀的操作流程堪稱 “傻瓜式”,新手跟著步驟走,輕松就能做出高質(zhì)量懸液:
儀器預(yù)熱:連接電源,打開儀器,選擇預(yù)設(shè)的 “唾液腺程序” 備用;
試劑準(zhǔn)備:將消化酶、終止液用流動(dòng)自來(lái)水提前解凍,混勻備用;
組織采集:小鼠處死后取出唾液腺,放入預(yù)冷 PBS 的培養(yǎng)皿中,冰上保存;

上樣處理:PBS 洗滌組織后剪碎,放入 2ml 消化管,加入 1ml 消化酶,將消化管放入儀器模塊;

自動(dòng)解離:點(diǎn)擊運(yùn)行,儀器按預(yù)設(shè)程序自動(dòng)完成 5 分鐘恒溫酶解,完成后自動(dòng)停止;

終止過(guò)濾:70μm 濾網(wǎng)過(guò)濾消化液,按 1:1 比例加入終止液終止酶解;
純化離心:濾液離心后棄上清,加入裂紅溶液冰上裂紅 3-5 分鐘,再加入 PBS + 碎片去除劑,離心后洗滌細(xì)胞兩次;

制得懸液:加入少量無(wú)菌 PBS 打散細(xì)胞沉淀,即得單細(xì)胞懸液;
質(zhì)量檢測(cè):AOPI 染色后,用細(xì)胞計(jì)數(shù)儀檢測(cè),輕松獲得活率、濃度、結(jié)團(tuán)率等關(guān)鍵數(shù)據(jù)。

05、實(shí)驗(yàn)小貼士,避坑更高效
用好單細(xì)胞懸液制備儀,這些細(xì)節(jié)千萬(wàn)別忽略,能讓實(shí)驗(yàn)效果更上一層樓:
1、單細(xì)胞試劑盒,溶解后需在 - 20℃低溫保存,使用前用涼水(切勿用溫?zé)崴┙鈨觯WC試劑活性;
2、細(xì)胞清洗過(guò)程中,避免清洗次數(shù)過(guò)多、時(shí)間過(guò)長(zhǎng),防止細(xì)胞損失,影響最終得率;
3、組織采集后盡快處理,全程冰上操作,避免細(xì)胞因缺氧、溫度變化受損;
4、消化酶的加入量需根據(jù)組織量調(diào)整,保證酶解效果的同時(shí),避免酶過(guò)量導(dǎo)致細(xì)胞損傷。
06、廣泛應(yīng)用場(chǎng)景,助力多領(lǐng)域科研
單細(xì)胞測(cè)序:為腫瘤異質(zhì)性、神經(jīng)科學(xué)、干細(xì)胞研究提供高活性、低結(jié)團(tuán)的單細(xì)胞樣本,提升測(cè)序數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和可靠性;

流式細(xì)胞分析:制備的高純度單細(xì)胞懸液,能有效避免碎片和團(tuán)塊干擾,讓流式檢測(cè)結(jié)果更精準(zhǔn)

原代細(xì)胞培養(yǎng):高活率的原代細(xì)胞為 3D 類器官培養(yǎng)、細(xì)胞分化研究提供良好基礎(chǔ)

藥物實(shí)驗(yàn):保留細(xì)胞原有生物學(xué)特性,讓藥物篩選、藥效評(píng)估的結(jié)果更貼近體內(nèi)實(shí)際情況。

從手工操作的 “費(fèi)時(shí)費(fèi)力低活率”,到儀器制備的 “高質(zhì)量高標(biāo)準(zhǔn)”,單細(xì)胞懸液制備儀的出現(xiàn),徹底改變了單細(xì)胞樣本制備的格局。它不僅大幅節(jié)省了科研人員的時(shí)間和精力,更以穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,為單細(xì)胞研究的深入開展保駕護(hù)航。
無(wú)論是基礎(chǔ)科研還是臨床研究,這款 “神器” 都能成為實(shí)驗(yàn)室的得力助手,讓你輕松解鎖高質(zhì)量單細(xì)胞懸液,讓實(shí)驗(yàn)研究更高效、更精準(zhǔn)!

